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当前:35版(2020年12月30日) 上一版 下一版
病理技术切片方法大全
仁寿县人民医院 杜钢

在现代医学的快速发展下,病理诊断越来越受到关注,被广泛应用到多种疾病的临床诊断中,同时也可为进一步治疗提供指导。病理组织切片质量如何对于疾病诊断精准度具有重要影响。而病理医生是否能够做出正确的病理诊断,在一定程度上受到制片质量的影响。现将病理技术切片与染色等相关知识分享如下。

 


病理检验对于取材的要求

 


    在病理组织检验中,取材首先需要确保的是新鲜。器官组织坏死,变化速度较快,为此要求迅速取材。在取材期间,应用锋利的刀片或剪刀,禁止用镊子对组织加以压迫,避免组织出现破裂或变形。同时需要明确所选组织块的大小及薄厚程度。若组织块体积过大或过厚,则固定液难以渗透,可能导致固定不佳的问题出现,而若组织块过小或过薄,则固定或脱水环节可能会发生扭曲变形问题。另外,病理检查所选的组织块必须具有代表性,可显示出组织的基础结构。以肝脏组织为例,需要有肝小叶,而肾脏检查则需要有皮质与髓质,肺部检查需要有支气管等。建议选择病变部位与健康部位交叉处的组织,其原因在于能够经由健康部位对比,更为清晰地观察到各种病理变化。

 


病理技术切片操作与注意事项

 


    病理技术切片需要确保组织完整性,贴片要恰当。首先,在设备上需要选择锋利的切片刀,避免基于锋利度不足导致切出的组织片卷起。其次,切片刀放置倾斜角度需要适合。若角度过大切片可能上卷,若角度过小切片可能皱起。组织切片厚度常规需控制在4~6um之间,若过厚则可能出现双层细胞现象,不利于观察。标准的病理组织切片,在切片期间需要尽量将所需要组织结构切出,要求完整性,在铺片时保证平整,不可出现折叠情况。建议在病理组织切片前,将包埋好的组织块预先冰冻10分钟左右,避免出现褶皱情况而不利于后续检查的开展。另外,在贴片环节中,应用小镊子夹取预先用刀片切割的蜡袋,放置到38摄氏度恒温水浴锅水面上。在此期间需要将蜡片光亮平整的一面贴于玻片上,同时使其处在玻片的中间位置。最后,切片展开后将载玻璃片放置在平盘上并做好标记,放置到60摄氏度温箱中烘片,超过12小时,避免染片期间出现脱落情况。

 


    病理技术切片中的标本检查及组织固定

 


    在标本检查方面,在收到病理标本后,需要立即核查标本与送检单名称等相关信息。观察标本状态,必要情况下可补充标本固定液,最后将送检单编号进行登记。在组织固定方面,固定环节的目的是,将病理活体或尸体解剖切取下的组织浸泡在适合的化学试剂中。此种化学试剂可促使组织细胞内蛋白质凝聚与沉淀,同时组织细胞可尽量维持原有形态结构。固定液常规应用10%的福尔马林,所用量常规为标本体积的10倍左右,固定时间可参考组织大小决定,若组织块较小,则时间可选择为4小时左右。

 

病理检验中染色封固需谨慎

 


    在组织病理检测的染色封固方面,首先染色液多为水溶液,针对此在染色前需将蜡脱去。常规情况下可应用二甲苯脱蜡,逐级复水与脱水浸蜡过程相反。但存在的问题是蜡片较薄,所需要时间比脱水浸蜡要短。将石蜡片用二甲苯脱蜡5~10分钟后放入到100%与95%以及90%等各级酒精溶液中3~5分钟,再放置到蒸馏水中3分钟。在染色期间,切片放置到苏木精中,染色5~10分钟。染色时间可结合染色剂成熟度与室内温度情况进行调整。若检测室内温度过高会促进染色,为此染色时间可适当缩短。在冬季检测若室内温度较低,可将其放置到恒温箱中进行染色。