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当前:23版(2021年01月20日) 上一版 下一版
不同组织病理切片的技术改进
仁寿县人民医院 杜钢

在对患者进行治疗前,医生需要诊断患者的疾病。病理诊断是一种常用的诊断技术,其是通过提取患者病变组织,运用病理组织学方法制备成病理切片,来进行染色、显微镜观察,同时需结合患者的临床症状来确诊疾病,避免误诊、漏诊等情况的发生。因此病理切片的质量与诊断结果的准确性之间存在直接性的关联,是确保诊断有效性的一个基础保障,但在制备切片的过程中,切面可能会出现裂痕、卷片、破碎等诸多情况,很大程度上会降低切片质量,影响出片时间,为避免这一情况的发生,就需要对不同组织病理切片技术进行改进。


    脂肪组织  脂肪组织中存在脂肪滴,其很难被脱水剂溶解,石蜡不能将其完全浸透。在对脂肪组织进行病灶取材的时候要取薄一些,修到最大面时,应用冰块冰冻蜡块几秒,温度低可以凝固未脱透的脂肪滴,然后再进行切片处理,厚度保持在5~6um,裱片温度应在42摄氏度以下,捞片速度要快。


    皮肤组织  其结构非常复杂,有很多的层次,在每一个层次间组织的紧密程度也是有所区别的。在对其进行切片处理时,可适当增加脱水时间,进行包埋时应让皮肤、皮下组织在同一面以保证切全皮肤全层。将蜡块内的皮肤组织让其表层向上夹在切片机夹口,从里向外完成切片过程,角质层在最后进行切割,来保障切片的完整性,对切片进行处理时可一定程度延长烤片时间,以避免出现脱片的情况。


    淋巴结组织  淋巴结组织的细胞丰富且结构紧密,在对淋巴结组织进行病变组织提取时,要注意切取组织的厚度应均匀,通常厚度在0.2~0.3cm为宜。淋巴结组织有一层致密的结缔组织膜,其会影响液体与组织之间的渗透,因此其固定时间应延长6~12小时,也可以固定一夜,在第二天再同其他组织共同予以脱水处理。若对切片应用乙醇脱水、中性甲醛固定,则时间上要增加1倍,可以在一定程度上减少二甲苯食物透明时间。切片厚度为2~3um时,其容易出现碎裂的情况,在进行展片的时候褶皱很难打开,会有不平整、裂纹等情况存在,这个时候的蜡块不应该进行长时间的冷冻,在修到最大面的时候应该先用沾有温水的拇指对蜡块捂几秒钟,再冰冻几秒,然后快速完成切片过程,这样可以有效避免上述情况的发生,形成一个完整的切片。最佳的展片水温是35℃,温度过高、过低都会影响切片呈现效果。在染苏木精的时候时间控制在3~5分钟即可。


    脑组织  这一部分的结构非常松散,质地柔软,存在的组织相对少一些,在对脑组织病变组织进行取材时,其厚度单位应小于mm,脱水处理不好会影响到其浸蜡过程,因此可酌情增加脱水时间,脱水后的脑组织非常脆弱,在进行包埋时一定要动作轻缓,不要让其受重压。应避免切片沾刀,可多冻一会,在进行展片的时候应将其放置进凉水中,待褶皱完全打开,再使用载玻片将其放入展片机中,注意烤片的时间不要过长。


    骨髓、骨组织  在对这一组织进行病理切片制备的时候需注意脱钙,首先应使用7%盐酸水溶液对骨髓组织进行脱钙处理,依据骨髓硬度决定脱钙的时间,过长、过短都会影响效果,因此时间掌握很重要。一般当骨髓组织漂起就可以了(25分钟左右);对于骨组织通常采用17%硝酸水溶液进行12~24小时的脱钙处理,当使用大头针能够将骨组织穿透时就可以停止脱钙了,对于蜡片修剪应慢、薄,并适当增加烤片时间。


    在对不同部位病变组织进行取材、病理切片制备时所要注意的问题也是不同的,要充分考虑组织的结构、质地以及细胞组织密集情况等,应规避一些影响切片完整性的因素。